クラミジア・トラコマティス (Ct) IgG ELISA 検査キット
体外診断および専門的使用のみを目的としています。
名前
抗 Ct IgG ELISA 検査キット (血清/血漿)
使用目的
このキットは、ヒト血清/血漿中のクラミジア・トラコマティス (Ct) IgG の定性的検出です。キットは
血清/血漿中の Ct 感染の臨床スクリーニングと診断に適しています。
試験原理
Ct 抗原はポリスチレン反応マイクロプレートに固相で吸収されます。 Ct IgG抗体がある場合
検体中では、マイクロプレートにコーティングされたCt抗原と結合し、抗原抗体複合体を形成し、
酵素標識された抗抗体に結合し、表面に抗原-抗体-抗体複合体を形成します。
マイクロプレートの反応により、基質の作用により対応するウェルに青色が表示されます。したがって、それは
ヒト血清/血漿中の Ct IgG を特異的に検出できます。
試験手順
1. 使用前にすべての試薬を 15 分間室温に平衡化します。
2. 使用前に洗浄バッファーを蒸留水で 1:40 の割合で希釈します。
3. 100μL のサンプル希釈液を対応するウェルに加えます (ブランクウェル、陰性) には加えないでください。
)サンプルはマイクロウェルの数に対応する必要があります。
プレートには、ネガティブコントロール 2 ウェル、ポジティブコントロール 1 ウェル、およびブランクを各プレートに用意する必要があります。
1をよくコントロールします。対応するウェルに 5μL のサンプルを加え、ピペットを使用して完全に混合し、
50μL のネガティブコントロールとポジティブコントロールをネガティブコントロールウェルとポジティブコントロールウェルに加えます(行わないでください)。
空のウェルに追加します)。
注: 検体ごとに個別の使い捨てピペットチップを使用し、ネガティブコントロールとポジティブコントロールを使用してください。
相互汚染を避けてください。
4. 30 秒間軽く振って混合します。シールプレートメンブレンを使用して 37°C で 20 分間インキュベートします
プレートを密閉します。
5. インキュベーションの終了後、プレートカバーを取り外して廃棄します。取り出し、洗浄バッファーを加えます
各ウェルを 20 秒間洗浄します。 5回繰り返します。最後の洗浄サイクルが終了したら、プレートを裏返します。
あぶらとり紙または清潔なタオルを使用し、軽くたたいて残りを取り除きます。
6. 酵素結合体 50μL をそれぞれ添加します (ブランクウェルには添加しないでください)。
7. プレートをシールした膜でプレートをシールした状態で、37℃で 20 分間インキュベートします。を繰り返します
ステップ5と同様に5回洗浄ステップを実行します。
8. 基質 A 50μL および基質 B 50μL を加えます (ブランクウェルには加えないでください)。 37℃で3分間インキュベートします。
シールプレート膜でプレートをシールした状態で 10 分間。
9. 50μL の停止液を各ウェルに加えます (ブランクウェルには加えないでください)。軽く振って混ぜます。
反応停止後10分以内の吸光度。ブランクを使用してプレートリーダーを校正します。
デュアルフィルター機器を使用する場合は、基準を設定してください。
波長630nm。検出にデュアル波長を使用する場合は、ブランクウェルを許可しないように設定します。を計算します。
カットオフ値を設定し、結果を評価します。
結果の解釈
クロノメトリー: マイクロプレートリーダーを使用して、450nm でサンプルの光学密度 (OD) を読み取ります。
ネガティブ コントロールの平均 OD 値 ≤ 0.1 およびポジティブ コントロールの平均 OD 値 ≥ 0.8 の場合、テストは有効です。
それ以外の場合、テストは無効です。
カットオフ値 (CO) = ネガティブコントロールの平均 OD 値 x 3 (平均値が 0.10 である場合に計算されます)
ネガティブ コントロール OD 値は < 0.10、ネガティブ コントロール OD の平均値が 0.10 未満の場合の実際の値によって計算されます。
値は > 0.10)
肯定的な結果: サンプル OD 値 ≥ CO