HIVウイルスのための人間の反HIV 1&2 Elisaテスト キット

3. 試金プロシージャ

• 全部品が使用の前に室温に達するようにしなさい。ddH2OのDiluteによって集中される洗浄緩衝1:20。
• 2つの陽性および3つの否定的な置かれる制御。サンプル希釈剤なしでそれぞれの井戸に肯定的な制御（HIV-1およびHIV-2）、また否定的な制御の100μlを正副2通りに分配しなさい。1つのブランク液体を加えないで背景制御としてよく置かれる。サンプル希釈剤の50μlを各テストによく加えれば、50のμlテスト血清を加えなさいテスト井戸への血しょうは完全に混合する。
• マイクロ プレートを湿らせられた箱に置き、30 min.の37°Cで孵化させなさい。
• 反作用の解決を放棄し、各井戸に350μlによって薄くされる洗浄緩衝を加えなさい。15-30secondsのために浸ることの後で洗浄緩衝を放棄しなさい。洗浄プロシージャを5回および次にすべての水を出すために版を活発に逆にすることおよび吸収性のペーパーの井戸の縁を数秒間妨げること繰り返しなさい。
• 各井戸に酵素の共役の100μlを加えなさい。1 min.の平らなベンチの渦巻くことによってマイクロ プレートそれを穏やかに混合しなさい。空白の井戸に酵素の共役を加えてはいけない。
• マイクロ プレートを湿らせられた箱に置き、30 min.の37°Cで孵化させなさい。
• 各井戸を薄くされた1X洗浄緩衝での活発に満たし、そしてすべての水を出すために版を逆にし、そして吸収性のペーパーの井戸の縁を数秒間妨げることによってそれぞれを5回よく洗浄しなさい。
• 基質の解決A （HRPの基質）の50μlを各井戸に加え、そして各井戸に基質の解決B （TMB）の50μlを加えなさい。穏やかに混合し、37°C for15 min.で孵化させなさい。
• 色反作用を停止するために各井戸に停止解決の1つの低下（50μl）を加えなさい。
• 二重フィルター版の読者との450 nm/630 nmでODの価値を読みなさい。それは単一フィルター版の読者との450 nmでODの価値を読む選択である。（すべての井戸からのすべてのODの読書を訂正する空白の井戸のODの価値を使用して