B型肝炎ウイルスコア抗原 (HBcAb) に対する抗体

エリザ TはいKそれは

試験室での診断および専門的な使用のみです.

製品名

抗HBc ELISA テストキット (血清/プラズマ)

意図された用途

この抗HBc ELISAテストキットは,ヒト血清/血中における B型肝炎ウイルスコア抗原 (HBcAb) に対する抗体の定性検出です.試料はヒト血清/プラズマにおける B型肝炎ウイルス感染の臨床スクリーニングと診断に適しています.

試験原則

肝炎Bウイルス (HBV) は封筒です双鎖DNAウイルスはヘパドナウイルス族に属し,C型肝炎ウイルス (HCV) とともに血液伝染性肝炎の主な原因であると認識されています軽症で目に見えない病気から 炎症性肝炎,重度の慢性肝疾患,肝硬化や肝がんを引き起こす場合もありますB型肝炎感染の分類には,感染の3段階 (潜伏期,急性期,回復期) に発現するいくつかの血清マーカーの特定が必要です.

ウイルスの主要成分は B型肝炎コア抗原 (HBcAg) です.このコア抗原は,約17kDの単一のポリペプチドで構成され,コア粒子の分解時に放出されます.少なくとも1つの免疫決定因子が抗原に存在します.

HBsAg が発症した直後,HBcAg に抗体 (抗HBc 総抗体と IgM) が現れ,決して消えません.免疫学的に検出可能な抗HBcなしでは B型肝炎感染を患うことができます.抗HBc検査では,様々な集団における B型肝炎の流行率に関するデータが得られます.これは,抗HBcが急性,低血圧,低血圧,低血圧,低血圧,低血圧,低血圧のマーカーだからです.慢性抗HBcの特定は 臨床的診断において不可欠です 他の肝炎B検査と共に抗HBcマーカーは,正しい診断とウイルスの進行を適切にモニタリングすることができます.抗HBcは,おそらく B型肝炎感染の唯一の指標である (HBsAg陰性患者の他の検査を含む).

HBcAb ELISA テストのシステムは,固体相,一段階の発育競争原理に基づいています.単一クロン抗HBcと競争し,微板にプリコーティングされた精製されたHBcAgの定量量を得る.. anti-HBc が存在しない場合,HRP結合抗HBcは井戸内の抗原と結合する.洗浄過程で,結合していないHRP結合は除去される.クロモゲン溶液AとBが井戸に加えられ,育卵中に,青い色の製品が現れます. 硫酸で反応を停止した後,青い色が黄色になります. 低色で示されるのは,サンプル内のHBcAgに対する抗体の存在です.色が全くない.

試料の要求事項

1.標本収集:特別な患者による準備は必要ありません.通常の実験室慣行に従ってサンプルを採取します.この検査では,新鮮な血清/血球サンプルを使用することができます.静脈点検によって採取された血液は,自然と完全に凝結することを許さなければならない 血清は,赤血球の血解を避けるために,できるだけ早く凝結から分離されなければならない血清/プラズマのサンプルが透明で微生物に汚染されていないように注意する必要があります.

2.H肝炎,黄血症,血解症の検査は不要です. 使った誤った結果が出る可能性があります熱を消さないで 標本標的分析剤の劣化を引き起こす可能性があります. 微生物汚染が目に見えるサンプルは決して使用しないでください.

3HBcAb ELISA は,単一の血清/血球サンプルを検査するためにのみ使用されます.死体サンプル,唾液,尿または他の体液,または集まった (混合) 血液を検査するために検査を使用しないでください.

4輸送および保管: 2- 8°Cで標本を保管する. 3日以内に検査が必要でない標本は冷凍状態で (-20°C以下) 保存する.複数の冷凍-解凍サイクルを避ける.輸送のために臨床サンプルと生体病原体輸送に関する現行の地方および国際規制に従って,サンプルを包装し,ラベルを付けなければならない.

試験手順

1すべての反応剤は使用前に室温15分放置する必要があります.

2洗浄バッファは,使用前に蒸留水で 1:40 速さで希釈します.

3試料はマイクロプレートの数に対応し,各プレートには負対照3孔,正対照2孔,空対照1孔が配置されるべきである.(二重波長検出で検出した場合(空の制御井を設定することは許されない).

注: 交差汚染を避けるため,各サンプル,負対対対対対に対して別々の廃棄パイペット先を使用する.

4対応する井戸に50μLのサンプルを加える (このキットが臨床補助診断に使用される場合,試験対象のサンプルを1:30で通常の塩溶液で調節して検査する.流行病学研究に使用される場合, 元のサンプルが検知できる) ),負対照孔と正対照孔に50μLの負対照と正対照を加える.酵素コンジュガート50μLをそれぞれ加える (空白の井戸に加えない).

5振動器で 30 秒間揺さぶる (このステップは非常に重要です). 密封板膜で板を密封して 37 °C で 30 分間保育します.

6発泡期が終わると,プレートカバーを外して捨てます.取り出して,各井戸に20秒間洗浄バッファを加えます. 5回繰り返します.最後の洗浄サイクルの後,洗浄器を外します.プレートをブラッシング紙かクリーンタオルに,残留物を除去するためにそれをタップします.

7. 基板A (50μL) と基板B (50μL) を加える (空白の井戸には加えない). 揺さぶるだけで優しく混ぜる. 密封板膜で板を密封して37°Cで15分間保育する.

8. 各プーンに50μLのストップ溶液を加える (空のプーンには加えない). ゆっくりと揺さぶって混ぜ,反応を停止してから10分以内に吸収量を測定する.プレートリーダーをBlank井戸で校正し,450nmで吸収量を読み.ダブルフィルタ機器を使用する場合,基準波長を630nmに設定します. 検出にダブル波長を使用した場合,空洞を設定することはできません. 切断値を計算し,結果を評価します.