抗体 (IgE) ELISA テストキット

意図された用途

  このキットでは,ヒト血清/血球における IgE 抗体 (IgE) の総量を量的に検知します.この結果は,タイプI アレルギー診断を支援できます.さらに,寄生虫性疾患の疑いがある患者でも,総IgE検査が推奨される可能性があります..

テスト の 原則

  直接的な過敏性 (I型アレルギー) は,特定のIgEによって媒介されます.患者の特定のIgEの増加は,IgE総タイトルの増加に伴います.遺伝的なアレルギー性皮膚炎の患者では,1 IU/mL は 2.4 ng IgE に等しい.IgE濃度が50まで上がる可能性がありますさらに,寄生虫性疾患の患者に IgE タイターが上昇します. 検査結果が正常値よりも高い場合は,確証された自己免疫疾患の影響も考慮する必要があります.

反応剤は健康な人の身体検査では推奨されません. 検査結果は陽性または陰性で,対応するIgE抗体検査結果は陽性または陰性です.患者の評価の唯一のインデックスではないかもしれない患者の臨床表現と他の検査を併用して 疾患の統合分析を行う必要があります

このキットの検出方法は酵素結合免疫検査です.この試料では,二重抗体サンドイッチ免疫検査の原則が採用されました.抗IgEを認識するモノクロナル抗体は,マイクロプレートの穴に前もってコーティングされたプレートの毛穴にヒト血清/血清サンプルと酵素でラベルされた別のモノクロナル抗体を加えました. 発泡と洗浄後,基板溶液を加えました.OD値が読み取られ,その内容がマイクロプレートリーダーで計算されました..

試験手順

1.すべての試料は使用前に室温に15分放置する必要があります.

2洗浄バッファは,使用前に蒸留水で 1:40 速さで希釈します.

3試料はマイクロプレートの数に対応し,各プレートには基準井戸が配備されるべきである (井戸の数は,参照と試験対象のサンプルによって決定される).

注: 各標本に対して別々の廃棄パイペット先を用い,クロス汚染を避けるため各標本を参照する.

4. 対応する井戸に100μLのサンプル稀释剤を加え,対応する井戸にそれぞれ20μLの基準S0,S1,S2,S3,S4,S5とサンプルを加える.

5混ぜるため,慎重に揺さぶる.シールプレートの膜でプレートをシールして,37°Cで30分間保育する.

6. 発泡期が終わると,プレートカバーを外して捨てます. 外して,10秒間各井戸に洗浄バッファを加えます. 5回繰り返します. 最後の洗浄サイクルの後,プレートをブラッシング紙かクリーンタオルに,残留物を除去するためにそれをタップします.

7結合物100μLをそれぞれ加え,シールプレート膜でプレートをシールして37°Cで30分間 Inkubateする.

86 ステップとして皿を洗う.

9. 基板A (50μL) と基板B (50μL) を加え,混ぜるため,軽く揺さぶる.シールプレート膜でプレートをシールして,37°Cで10分間保育する.

10. 各井戸に50μLのストップ溶液を加える. ゆっくりと揺さぶって混ぜ,反応を停止してから10分以内に吸収量を読み取ります.その後,マイクロプレートリーダーで450nm/630nmで吸収値を読み取ります.濃度を計算し,結果を評価する.