ネズミ科のIfnガンマRUOテスト キットのマウスのインターフェロン ガンマ サンドイッチ方法

マウスのインターフェロンのγ;ガンマ インターフェロン;IFN-γ;IFNガンマ;IFNG;ELISAのキット

マウスの血清、血しょう、培養基または生物的液体のインターフェロンのγ （IFN-γ）の集中の量的な生体外の決定のため。

主義

このELISAのキットは方法としてサンドイッチELISAを使用する。このキットで提供されるMicroelisaのstripplateはIFN-γに特定の抗体とプリコートされた。標準かサンプルは適切なMicroelisaのstripplateの井戸に加えられ、特定の抗体に結合した。それから西洋わさびの過酸化酵素（HRP） - IFN-γのためにMicroelisaの各stripplateに特定の活用された抗体はよく加えられ、孵化する。自由な部品は洗い流される。TMBの基質の解決は各井戸に加えられる。IFN-γおよびHRPによってIFN-γの活用される抗体を含んでいるそれらの井戸だけ色で青いようで、次に停止解決の付加の後で黄色い回る。光学濃度（OD）は450 nmの波長でspectrophotometrically測定される。ODの価値はIFN-γの集中に比例している。標準的なカーブとサンプルのODを比較することによってサンプルのIFN-γの集中を計算できる。

キットを与えられる材料

• 標準の希薄

10の井戸はMicroelisaのstripplateの標準のために置かれる。よく1およびよく2では、100μl標準ソリューションおよび50μl標準的な希薄の緩衝はよく加えられ、混合される。よく3およびよく4では、よく1からの100μl解決はおよびよく2それぞれ加えられる。それから50μl標準的な希薄の緩衝は加えられ、よく混合される。50μl解決は井戸3およびよく4.から放棄される。よく5およびよく6では、よく3からの50μl解決はおよびよく4それぞれ加えられる。それから50μl標準的な希薄の緩衝は加えられ、よく混合される。よく7およびよく8では、よく5からの50μl解決はおよびよく6それぞれ加えられる。それから50μl標準的な希薄の緩衝は加えられ、よく混合される。よく9およびよく10では、よく7からの50μl解決はおよびよく8それぞれ加えられる。それから50μl標準的な希薄の緩衝は加えられ、よく混合される。50μl解決は井戸9およびよく10.から放棄される。希薄の後で、すべての井戸の総容積は50μlであり、集中は180 pg/ml、120pg/ml、60 pg/ml、30pg/mlおよび15 pg/ml、それぞれである。

結果の計算

マウスのIFN-γの標準および対応する読書ODの知られていた集中は丸太のスケール（ｘ軸）および丸太のスケール（ｙ軸）でそれぞれ計画される。サンプルのマウスIFN-γの集中は計画によってＹ軸のサンプルのO.D.定められる。元の集中は希薄の要因の増加によって計算される。

精密

内部試金の精密（試金内の精密）:低く、中間高レベルマウスIFN-γが付いている3つのサンプルは20回1つの版の、それぞれテストされた。

相互試金の精密（試金間の精密）:低く、中間高レベルマウスIFN-γが付いている3つのサンプルは3つの版、各版の8つの反復実験でテストされた。

CV （%） = SD/meanX100

内部試金:CV<10>

相互試金:CV<12>

試金の範囲

3pg/ml-200 pg/ml

感受性:

0.8pg/ml