EBV-VCA IgA AbテストELISAキットの酵素の免疫学的検定テスト血しょう標本

EBV-VCA IgA Ab ELISAのキット カタログいいえ:BE501A
エプスタイン・バール・ウイルス（EBV）のウイルスのcapsidの抗原（VCA）へのIgAの抗体の検出のための酵素の免疫学的検定。
 
1. 試金の原則
EBV-VCA IgA Ab ELISAのキットはmicroplateの井戸が非常に抗原的な区分EBV-VCAに相当して組換えの抗原が塗られる検出システムを利用する。血清または血しょう標本、制御は井戸に加えられる。孵化の間に、標本のEBV-VCAの現在のために特定のIgAの抗体はmicroplateの井戸に固定された組換えの抗原に結合する。井戸は自由な材料を取除くために洗浄され反人間のIgAの過酸化酵素の共役は抗原抗体の複合体に結合し、余分で自由な酵素の共役は洗浄によって再度取除かれる。酵素の基質、tetramethylbenzidine （TMB）は基質が縛られた酵素によって加水分解される青いですか青緑色色はEBV-VCA IgAの抗体を含んでいる井戸で成長する孵化に、加えられ。酵素反応は硫酸の付加立寄られる。開発される色の強度は450nm （450 nm/630 nm）でspectrophotometrically読まれ、標本で現在の抗体の量に比例している。
試薬
 
2. キットを与えられる材料:

 
3. 試金プロシージャ

1. 使用（およそ30分）の前に室温にELISAのキット（すべての試薬）、および標本を持って来なさい。
2. ddH2OのDiluteによって集中される洗浄緩衝1:19。例えば、洗浄緩衝濃縮物の5つのmlは脱イオンされると100つのmLの総容積にまたは蒸留水薄くなるべきである。
3. よの各テスト、セット1のブランク背景制御として、2つの肯定的で、3つの否定的な制御のため。個々の井戸に100ml肯定的な制御および否定的な制御複写を分配しなさい。サンプルもHRP共役もブランクによく加えられるべきではない。
4. 制御を除く個別テストの井戸にサンプル希薄の100mlを分配しなさい。
5. テスト井戸に各テスト サンプルの10mlを加えなさい;混合するべき渦。
6. 37°Cで30分の間孵化させなさい
7. 各井戸を薄くされた洗浄緩衝での活発に満たし、そしてすべての水を出すために版を逆にし、そして吸収性のペーパーの井戸の縁を数秒間妨げることによってそれぞれを5回よく洗浄しなさい。
8. 各井戸に酵素の共役の100mlを加えなさい。1分の平らなベンチの渦巻くことによってマイクロ プレートそれを穏やかに混合しなさい。ブランクに酵素の共役をよく加えてはいけない。
9. 37°Cで20分の間孵化させなさい
10. ステップ7.として版を5回洗浄しなさい。
11. 基質の解決A （HRP基質）の1つの低下（50ml）を各井戸に加え、そして各井戸に基質の解決B （TMB）の1の低下（50ml）を加えなさい。穏やかに混合し、30分の37°Cで孵化させなさい。
12. 色反作用を停止するために各井戸に停止解決の1つの低下（50ml）を加えなさい。二重フィルター版の読者との450 nm/630 nmでODの価値を読みなさい。それは単一フィルター版の読者との450 nmでODの価値を読む選択である。（すべての井戸からのすべてのODの読書を訂正する空白の井戸のODの価値を使用して）